灵芝孢子研究进展
2012年10月12日 14:42 来源:农博网
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赵东旭等
灵芝是担子菌纲多孔菌科灵芝属真菌赤芝和黄芝的总称,具有扶正固本等功效,被《本经》成为上品。近年来,对灵芝属真菌的化学成分及临床作用的研究颇多,对灵芝的生殖细胞孢子药用价值的研究也逐渐增加。笔者拟综述灵芝孢子的研究近况。
1化学组成
由于灵芝孢子的外部包裹了两层坚韧的外壁,一般的物理化学方法有很难将其打破,因此也就限制了对其化学组成、生物活性成分的认识。最近,一些有效的破壁方法的建立促进了对灵芝孢子中生物活性成分的提取、药用价值的研究。
灵芝孢子的化学成分可分为以下几类:蛋白质和氨基酸类、糖肽类、维生素类、胡萝卜素、甾醇类、三萜类、生物碱类、脂肪酸类、内酯和无机离子等。灵芝孢子蛋白质含量达18%,其中异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、蛋氨酸、胱氨酸、苯丙氨酸等机体必需氨基酸的含量非常丰富,均高达10克/千克。维生素类主要是维生素E,其含量超过60毫克/100克,另外也含有少量的维生素C。灵芝孢子中富含多糖和寡糖,其中二糖、三糖、四糖分别是194、167、和250毫克/100克。从赤芝孢子粉的酸性提取物中分离到了一些三萜类化合物,他们是赤芝孢子酸A、B、C和E。三萜类是灵芝子实体中含量高而且种类颇多的一类有机化合物,其种类超过100种,但在灵芝孢子粉中尚未找到如此多的三萜类物质。由于三萜类是重要的生物活性物质,因此三萜类化合物在灵芝子实体与孢子中的差异暗示了二者可能具有不同的药用价值。
灵芝孢子中的脂肪酸类有二十四烷酸(C)、硬脂酸(C)、棕榈酸(C)、二十二烷酸(C)等。内酯类属五环三萜内酯,有赤芝孢子内酯(ganosporelactone)A和B。生物碱类有胆碱(choline)、甜菜碱(betaine)和硫组氨酸甲基内胺盐。灵芝孢子中的无机元素有钙、磷、铁、镁、钠、、锗、硒等,其中有机锗与人体健康和疾病的防治有密切的关系。
2 药理作用
2.1 免疫效应:灵芝孢子粉醇提物的水溶部分在体内能抑制小鼠的迟发型过敏反应和对绵羊细胞的初次抗体应答及鸡红细胞诱导的循环抗体水平,在体外可抑制有丝分裂原刺激小鼠淋巴细胞和人扁桃淋巴细胞的增殖反应。
2.2 对实验性糖尿病的防治作用:采用孢子粉醇提物的水溶物部分对小鼠中由四氧嘧啶引起的糖尿病的诱发诱发有一定的防治作用;该提取物亦能拮抗正常小鼠IP葡萄糖或肾上腺素引起的血糖升高,改善了糖尿病小鼠的葡萄糖耐量。
2.3 抗癌作用:在以小鼠或大鼠为实验材料的研究中发现,体外给动物饲用破壁的孢子粉后,胸腺/体重比显著增加,血清凝集素水平增加,T淋巴细胞转化能力显著增加;腹腔巨噬细胞吞噬能力显著提高并抑制了动物移植性肿瘤的生长,提高了血液中谷光甘肽过氧化物酶活力。动物在饲用孢子粉后所表现高活性免疫能力可能与孢子粉中丰富的肽多糖和高含量的E有关。最近发现灵芝孢子的醇提物在体外具有直接抑制癌细胞生长作用。灵芝孢子醇提物在1毫克/毫升是对人宫颈癌细胞HELA、人肝癌细胞HEPG2等均具有较强的杀伤能力。
2.4 降低胆固醇作用:大鼠在口服灵芝孢子粉并用高脂饲料后,抑制了血清中总胆固醇含量的升高,灵芝孢子粉降低胆固醇的作用很可能与赤芝孢子内酯有关。
2.5 提高机体耐缺养的能力:研究表明,昆明种小鼠口服破壁孢子粉600ml/(Kg.d),14d 后在无氧环境下存活时间显著延长,说明口服孢子粉能增加抗缺氧能力。推测口服孢子粉能增加血液中红细胞和血红细胞的含量,提高机体的带氧和含氧功能并降低机体耗氧量。
2.6 对神经系统的影响: 孢子粉先用乙醚脱脂后用乙醇回流,得到的提取液浓缩至膏状后制成水剂,称之为“孢醇水”,它能使小鼠自主活动明显减少并可延长小鼠的睡眠时间。另外,临床用于治疗内脏多动、精神紧张等疾病时也取得了较好的效果。
3.临床应用
3.1 治疗皮肤病:灵芝孢子粉制剂能抑制免疫性肌炎大鼠肌肉组织中磷酸肌酸激酶(CPK)的下降及血清中CPK的升高,并使肌炎症减轻。磷酸肌酸是脊椎动物肌肉组织中唯一能起暂时贮能作用的物质,在CPK作用下能将其所贮存能量随磷酸基团迅速转移给ADP,以形成ATP,从而使ATP处于相对稳定的水平,也就保证了肌肉组织中的能量供应,保持了肌肉组织正常的生活状态,从而促使了肌炎症减轻;临床试用与治疗皮肌炎、硬皮病等自身免疫有关疾病时亦取得较好疗效;另外在治疗多发性肌炎、红斑狼疮,银屑病方面的效果也较好。
3.2 治疗肌无力症:萎缩性肌强直又名强直性肌营养不良,是一种较少见的家族遗传性疾病,主要临床表现有肌强直或咀嚼力弱,逐渐发展为四肢无力,过去曾有人注射促肾上腺皮质激素、强的松、胰岛素、葡萄糖等,但效果均不显著,而且有时出现一些副作用,后来改用注射赤芝孢子粉制剂(400mg/d)取得了满意的疗效,而无副作用。
4. 毒性实验及致突变实验
给小鼠口服灵芝孢子粉,LD50大于10。0 g/Kg体重,属实际无毒级;三项致突变实验(A 、微核、精子畸形实验)结果均为阴性。
5. 展望
有关灵芝孢子粉的研究虽说以有近20年的时间,但总的说来还停留在较为肤浅的水平。主要原因是:灵芝孢子粉的收集比较困难,不易得到大量的材料以供研究;另外对使用灵芝孢子是否需要破壁还存在认识问题。长期以来,研究及临床使用的孢子均是未经过破壁处理的,最近我们较好的解决的孢子破壁这一难题,并对破壁与不破壁孢子进行了一些初步的比较研究。现已发现破壁孢子粉中的还原糖和多肽较不破壁孢子粉易与提取,而从前得到的含量明显高于后者。更为重要的是,破壁孢子粉醇提液比不破壁孢子具有更强的体外毒杀癌细胞的活性。这些结果表明孢子破壁技术将为灵芝孢子的研究及利用提供一种有利的手段。
为了更好的研究和开发灵芝孢子这一宝贵的中药资源,侍待开展的工作是:
1、开展更有效的孢子粉收集方法的研究以便于大量收集孢子粉。
2、加强对新破壁方法的研究以利于充分利用孢子粉的有效成分。
3、虽说孢子制剂已用于临床实验,但所有的制剂均是孢子的粗提物,因此有必要对其进行纯化,尤其在孢子对肿瘤细胞的直接毒杀作用方面,对其有效成分的纯化、分析、鉴定将为进一步的模拟、化学合成新的抗肿瘤药物奠定基础。
4、更深入的药理研究对于完善有关灵芝孢子药用价值的认识是十分必要的。
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