猪瘟病毒链球菌绿脓杆菌和支原体混合感染的诊断与防治
2004年08月17日 17:58 来源：中国牧业网
湖南省长沙市某猪场于2001年3～ 4月发生了 以病猪精神沉郁,体温升高至41～ 42℃,四肢、背、 腹下、尾等部位皮肤有出血斑,发病快,死亡率高为 特点的疾病。经临床检查、流行病学、病理剖检和实 验室诊断,此次疫情确诊为猪瘟病毒、链球菌、绿脓 杆菌和支原体混合感染,报告如下。
1 发病情况 该猪场现有大小猪只1 700多头,品 种有大约克和杜洛克。自2001年3月12日开始发 病,发病的多为体重50 kg以上的肥猪,然后后备母 猪发病,经产母猪及体重40 kg以下的猪不发。
2 临床表现 本次疫情以急性发病为主,多数发病 猪体温升高至41～ 42℃,初期便秘,后期拉暗红色 液状粪便。病初表现为食欲不振或废绝,精神沉郁, 行动迟缓,呼吸困难,咳嗽,气喘,眼结膜潮红,分泌 物增多。随着病情的发展,病猪全身肌肉发颤,站立 不稳,后躯摇摆。死前体温下降,前后肢作游泳状摆 动;大多数发病公猪的包皮积尿,挤压后排出灰白色 脓汁、腥臭;病程稍长的病猪由于废食,体质逐渐瘦 弱,衰竭死亡。
3 病理剖检 总共剖检19头病死猪,病理变化大 致相同:口腔犬齿、门齿两旁呈对称性溃疡;猪的两 耳、四肢下端、胸、背、腹部和尾部呈玫瑰红色,剖开 后血液凝固不良;多数淋巴结肿大,呈暗红色,周边 出血,切面呈大理石样外观;脾暗红色,脾脏边缘有 红色颗粒状凸起,并有蚕豆大小的三角形梗死灶,呈 锯齿状突出脾表面;胆囊充盈,胆汁粘稠呈墨绿色, 胆囊黏膜有针尖大小的弥漫性出血点;肾脏稍肿大, 肾脏表面可见芝麻大小的出血点,切开肾脏,肾皮 质、肾乳头出血;心包积液,心脏质地柔软,心外膜表 面有黄色胶冻状物质呈环状环绕心脏,冠状沟两旁 有针尖大小的出血点;喉头、气管黏膜充血潮红,气 管内充满血红色泡沫,喉头会厌软骨处有条纹状出 血;肺的尖叶、心叶、中间叶和膈叶前缘有“肉”样变, 切开肺脏,流出白色粘稠的浓汁;肺门淋巴结、纵膈 淋巴结呈暗紫红色、肿大,切面外翻,周边出血;胃的 底部黏膜大面积瘀血或出血,黏膜易脱落;大、小肠 肠壁变薄,十二指肠、空肠和结肠黏膜广泛充血或出 血,回盲瓣有钮扣状溃疡,有的表面形成黑色结痂; 肠系膜淋巴结肿大,呈暗红色,周边出血,呈大理石 样外观。膀胱黏膜有弥漫性出血点。
4 实验室检验 4. 1 直接涂片 取病猪的肺、肝、脾、淋巴结触片, 经革兰氏染色、镜检,可见单个或成双排列,间或3～ 4 个菌体相连呈短链状的革兰氏阳性球菌与单个、 成双或成堆排列的革兰氏阴性短小杆菌。 4. 2 细菌分离培养与观察 无菌采取病死猪肺脏、 淋巴结、脾和关节液接种普通营养琼脂、麦康凯琼脂 平皿和普通肉汤,置37℃培养24 h ,培养基均有细 菌生长。肉汤培养基变浑浊,管底有沉淀,有白色菌 膜生成,普通肉汤上层约1 cm处出现蓝绿色荧光色 素。在普通琼脂培养基上长出两种不同的菌落。一 种菌落生长良好,光滑、湿润、微隆起、边缘整齐或呈 波状的中等大小的菌落,能产生蓝绿色荧光色素,使 培养基变成绿色,培养物有特殊的芳香味。挑取典型 菌落涂片染色,镜检为革兰氏阴性短小杆菌,常单个 或成双排列。另一种菌落生长不良,偶见零散灰白 色、半透明、光滑的细小菌落;涂片染色镜检为革兰 氏阳性的细小球菌,常单个或3～ 4个连成短链,再 接种鲜血琼脂培养基,长出一种密布均匀、表面光 滑、针尖大小、半透明、不溶血菌落。挑取该菌落涂片 染色镜检为革兰氏阳性的链球菌,多数单个或3～ 4 个连成短链。麦康凯琼脂培养基上长出一种光滑、湿 润、微隆、边缘整齐或呈波浪状的中等大小的灰白 色菌落,能产生蓝绿色荧光色素,使培养基变成绿 色,挑取菌落涂片染色,镜检为革兰氏阴性短小杆 菌,常单个或成双排列。 4. 3 生化试验 取上述两种典型菌落经两次纯化后 的纯培养物作生化试验,革兰氏染色为阳性的菌落生 化试验结果见表1;革兰氏阴性的菌落生化试验结果见 表2。生化试验结果:革兰氏阳性菌生化试验结果与兽 疫链球菌的生化特点相符 [ 2 ] ; 革兰氏阴性菌的生化特 点与绿脓杆菌的生化特点相符 [ 2 ] 。所以此革兰氏阳性 菌为链球菌,革兰氏阴性菌为绿脓杆菌。 4. 4 动物接种试验 取这两种不同细菌的肉汤纯 培养物,分别腹腔接种3只小鼠0. 2 m l?只,同时设 3 只作对照。接种革兰氏阴性菌的小鼠于接种后6 h 内全部死亡;接种革兰氏阳性菌的小鼠于接种后72 h 内死亡1只,而对照鼠正常。剖检发现死亡的小鼠 呈败血症变化,并从小鼠脏器中分离到与病死猪体 内相同的细菌。 4. 5 药敏试验 将两种细菌分别作药敏试验,该革 兰氏阳性菌对青霉素、庆大霉素、氯霉素、氨苄西林、 丁胺卡那霉素、痢特灵、头孢拉定高敏;对卡那霉素、 环丙沙星、氧氟沙星中敏;对链霉素、红霉素、强力霉 素、四环素、新霉素、乙酰螺旋霉素、壮观霉素、磺胺 嘧啶等低敏。该革兰氏阴性菌对链霉素、庆大霉素、 卡那霉素、诺氟沙星、环丙沙星、丁胺卡那霉素高敏; 对强力霉素、氧氟沙星中敏;对青霉素、氯霉素、氨苄 西林、痢特灵、头孢拉定、四环素、新霉素、壮观霉素、 磺胺嘧啶等低敏。
5 猪瘟病毒检测 采取脾、淋巴结两头份,送湖南 省出入境检验检疫局,作HCVA g2EL ISA检测,结 果为猪瘟阳性。
6 防治 及时隔离病猪,深埋或焚烧病死猪,加强 环境消毒,尽量减少污染面积。对疑似健康的猪群加 倍剂量紧急接种猪瘟兔化弱毒疫苗,采用青霉素、丁胺卡那霉素进行治疗,病情很快得到控制。
7 小结和讨论
7. 1 经流行病学、临床症状、病理剖检、细菌学和血 清学检验鉴定,确诊为猪瘟病毒、链球菌、猪绿脓杆 菌和支原体混合感染。由于病原的多样性,使该病在 流行病学、临床症状和病理变化等方面表现得非常 复杂。确诊之后,建议畜主用猪瘟兔化弱毒疫苗进行 紧急接种,同时采用青霉素、丁胺卡那霉素进行治 疗,一周回访,疫情得到控制,猪场恢复正常,这说明 此次疫情诊断是正确的。
7.2 该猪场虽然采用超前免疫, 45 日龄再次加倍 剂量接种猪瘟兔化弱毒疫苗防制猪瘟的方案,但是 此次发生了猪瘟,其原因是多方面的,主要有三:其 一, 3月份连绵多雨,气候潮湿,是造成此次发病的 外部条件之一;其二,猪场饮用水是从猪场排放污 水的池塘中抽取上来的,未经任何消毒且污浊不堪; 其三,各栋猪舍的建设不合要求,大小猪舍之间相 隔不到5 m ,且发病猪隔离不严,消毒不彻底。
7. 3 所分离链球菌的培养物, 对小鼠的致病力弱, 作者在多次链球菌病的诊断中,都有相同的经历,而 直接用病料如关节液接种小鼠,则毒力较强,这可能是因为链球菌经过人工培养,毒力减弱的缘故。该猪场曾多次发生过猪链球菌病,但由于该畜主刚接管猪场,对猪场病史不清而未接种猪链球菌疫苗。因此凡有链球菌流行史的地区,必须接种猪链球菌疫苗。
7. 4 猪支原体病在正常情况下死亡率不高,但本病 与链球菌、猪瘟病毒等并发感染时,常造成严重的经济损失。2001年3月初该场就有猪零星发病,未能及时采取措施,结果造成很大损失。因此,基层兽医工作者对疫情应做到早发现、早诊断、早采取措施治疗,是非常必要的。
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