动物胚胎移植与体细胞克隆介绍
2012年10月12日 14:41 来源:农博网
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动物胚胎移植主要是通过对优良供体母畜作同期排卵处理和体内胚胎生产或体外人工授精(IVF)的方法,以大量获得优良的动物胚胎后再将其移植给普通代孕受体母牛进行快速繁殖优良动物的生物技术。胚胎移植技术主要用于快速扩大优秀种公牛和核心母牛的数量。尽管单个胚胎的生产成本较高,但由于种公牛和种母牛较高的经济价值和社会价值,以及利用胚胎移植在育种方面可以获得同胞或同卵双生牛进行后裔测定等优势,因此,该技术在种公牛的选育和优质核心母牛群的培育以及加快育种步伐方面均具有极大的优越性。
哺乳动物体细胞克隆技术,是指通过显微操作去核、核供体细胞的融合、重构胚激活等实验室手段,将某种类型的体细胞和核受体(一般是成熟卵母细胞)进行体外融合重构以形成克隆胚胎,再将克隆胚进行胚胎移植给代孕的母畜,达到大量生产遗传同质哺乳动物的一种生物技术。目前,动物克隆技术还没有完全成熟,因此,主要是用于生产具有高附加值的转基因动物、优良种畜和保护濒危动物遗传资源方面。
(一)发展回顾
动物胚胎移植技术历时20年的发展,对牛来说,在无手术情况下,可一次冲卵30枚,平均可用胚胎数为5.5枚/头。超数排卵和胚胎移植(MOET)育种计划在至少8个国家得到全面实行,遗传改良进展比预期提高了10%。奶牛胚胎移植的总数正在逐年增加,全球1997年移植胚胎数接近460,000,现在每年大约500,000枚左右。在美国,奶牛生产群中有0.2%的母牛是通过胚胎移植获得,但95%以上的种公牛和优良种母牛是胚胎移植获得的。“七五”和“八五”期间,我国“863”计划、国家攻关计划、农业部重点攻关计划和部分省市的研究计划都重点支持了动物胚胎移植技术的研究与开发,包括胚胎分割、卵母细胞体外成熟、体外人工授精、核移植技术等,并利用体外受精和胚胎移植技术繁育了大量的优良种畜,如内蒙古共生产良种牛胚胎3万多枚,建立中试移植基地4处,几年来共移植受体1000余头(次),获得试管牛犊300余头;新疆与宁夏已建成700余头供体牛的牛胚胎移植产业化基地,生产良种牛胚胎1530余枚,进口安格斯肉牛胚胎1300余枚,移植受体牛300头,冻胚平均妊娠率40%以上;北京、河南、山东、黑龙江、广西等地也获得了较大数量的胚胎移植优质牛。内蒙古在国家计委的支持下,建立了10万枚优质羊的胚胎移植基地,1000多只试管羊已经出生;国家计委还先后支持了北京市奶牛中心、江西金牛集团、广西大学等建立奶牛胚胎移植中心并进行大规模的产业化奶牛胚胎生产。目前,我国奶牛的胚胎移植数量已接近10,000枚左右/年,在发展中国家处于先进水平。据不完全统计,我国有以胚胎移植技术为核心的生物技术公司32家。由中国奶牛协会、中国农业大学、中国农业科学院畜牧研究所、北京奶牛中心等单位承担的“中国荷斯坦奶牛MOET育种体系的建立与实施”项目以及内蒙古大学和广西大学等主持的“牛体外受精技术的研究与开发”项目,研究开发结果达到了国际先进水平,在2000年分别授予了国家科学技术发明二等奖。
1997年2月,世界上第一只体细胞克隆绵羊—“多莉”在英国诞生。这一成果开创了哺乳动物体细胞克隆的里程碑。一时间,世界范围内刮起了强劲的“克隆”旋风, 体细胞克隆小鼠、山羊、牛、猪等都相继出世。我国科学家在利用胚胎细胞作为核供体来产生克隆动物的研究方面一度处于国际先进水平,新疆畜牧科学院、西北农业大学、东北农业大学等利用胚胎细胞克隆生产出了克隆牛、克隆羊和克隆猪;特别是在1995年,获得过45只再克隆的胚胎克隆山羊,是当时世界上最大的胚胎克隆羊群体,但我国没能够在体细胞克隆技术方面获得突破。1999年10月中科院发育所和扬州大学合作成功地克隆出转基因体细胞克隆山羊;同年,我国台湾省畜产研究所在克隆猪上取得了成功;2000年6月西北农林科技大学再次成功获得了体细胞克隆山羊“元元”和“阳阳”,标志着我国动物体细胞克隆技术的崛起。
(二)主要进展
2001年我国动物胚胎移植技术再次取得重要进展,仅奶牛胚胎移植的数量就达到11,000余枚,其中直接从国外进口的优良胚胎数量接近5000枚。同年,我国优良水牛的胚胎移植成功率也获得突破性进展。优良种绵羊(如多赛特)和山羊(如波尔山羊)的胚胎需求量激增,全年胚胎移植数量已超过20,000枚。2001年我国不仅在奶牛胚胎移植的数量上有很大发展,而且技术水平也已经达到国际先进水平,高产奶牛超数排卵技术每头生产可用胚胎6-8枚,鲜胚移植妊娠率达到60%,冷冻胚胎移植妊娠率为50%以上。
2001年我国在体细胞克隆牛方面也取得了突破性进展。2001年10月克隆奶牛在深圳市绿鹏公司转基因动物繁殖基地诞生。2001年11月山东莱阳农学院的科学家成功地克隆了2头健康的日本黑牛“康康”和“双双”。2002年3月至5月,中国科学院动物研究所和中国农业大学的科学家们已经能够在国内成功生产体细胞克隆牛胚胎,并已开始了较大规模的体细胞克隆胚胎的移植试验,其各项技术指标均已接近或达到国际先进水平。
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