家庭春兰组培快速繁殖-花木组培技术
2012年10月12日 14:38 来源:农博网
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20世纪70年代以来,科研院所已在兰科植物中采用生物工程技术繁殖兰花,其效果是传统方法无法媲美的。笔者尝试在家庭环境里开展此项工作,已获得小批量的春兰试管苗。现将具体做法介绍如下,供兰友们参考。
①建立小型家庭组织培养室,自制设备,简易土法上马。众所周知该项工作要在无菌条件下进行。为此,必须研制密封良好的玻璃接种箱、净化空气装置,采取种种技术措施,以降低转瓶污染率。用酒精喷雾降尘,成功率上升为92%,这就给筛选最佳培养基配方赢得时间,奠定了良好的基础。
②在家庭环境里如何才能做到无菌操作呢?笔者着重从以下几个方面入手:
所有接触培养基、能耐高温的器皿用干热法(140~150℃)处理,对不耐高温的用具采用化学方法灭菌消毒。
为解决接种时需在火焰上进行的问题(因箱内几乎无空气),增添了一只30瓦的电炉,但因温度高易灼坏外植体,故又加设了通风降温的设施。
为了减少刀具第二次在环流中污染,高温涌毒后安放在一端封闭的筒内,同时不断鼓入净化的空气加以冷却,确保外植体安然无恙地进入营养基瓶中。
所有进入箱内的物品均需酒精消毒后才放进,凡是带菌者不许人箱。箱体消毒程序是酒精喷露后紫外线消毒,并定期用甲醛加高锰酸钾进行熏蒸……
③选用适宜的培养基四方。诱导一分化一生根均采用MS基加萘乙酸、细胞分裂素。但不同的生长阶段还需做成分上的调整,特别是生根时由于兰生根较其他品种花卉难些,故采用高浓度的NAA浸泡数秒的做法,效果良好。
④外值体的采取、消毒。外植体以长根的幼苗(未展开叶),随采随接种最好,成活率较高(接种时节以10月至次年2月最好)。外植体消毒,笔者采取0.1升汞加0.l%浓盐酸多次消毒的办法,效果更佳。
⑤培养环境。光照1000~2000勒,10~16小时,培养湿度26℃土2℃,空气湿度应控制在较低的水平(70%~80%),否则极易再一次污染。
几点体会:
①在家庭中建立小型组培宜是可行的,它的投资少(可充分利用家中的条件)。笔者从筹备到进行试只花去数百元,该试验设备也可用于开展其他品种(如木本、药用植物等)的研究工作。
②无菌操作必须从思想上重视,操作上谨慎才是。否则损兵折将,后果不堪设想。
③目前因手边无实体显微镜,只能做以芽生芽的试验。采取一些措施如分期切制样品、液体加旋转床的方案,是取得大批量类原球茎的一种途径,其繁殖速度也会有所突破。
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